【摘要】 使用免疫共沉淀与质谱联用 (CoIP/MS),鉴定出 23 种与母羊卵巢提取物中的 FecB 特异性相互作用的蛋白质。

BMPR-1B 是转化生长因子 β 超家族的一部分,在母羊产仔数中发挥着关键作用[1]。BMPR-1B 基因(即 FecB 基因)中外显子 8 突变的功能丧失可以增加母羊排卵率和产仔数[2,3]

 

研究构建了真核表达系统,制备了单克隆抗体,并表征了 BMPR-1B/FecB 蛋白-蛋白相互作用(PPIs)。使用免疫共沉淀与质谱联用 (CoIP/MS),鉴定出 23 种与母羊卵巢提取物中的 FecB 特异性相互作用的蛋白质。

 

对选定 PPI 的生物信息学分析表明,FecB 主要通过卵巢中的信号转导与其他几种 BMP 相关。FecB 及其相关的相互作用蛋白通过 BMP2 和 BMP4 途径丰富了繁殖过程。通过分析生物过程和途径,确定信号转导是通过 Smads 蛋白和 TGF-β 信号通路进行的。

 

此外,还鉴定了与 FecB 相互作用且与母羊排卵和产仔数相关的其他靶蛋白(GDF5、GDF9、RhoD 和 HSP 10)。CoIP-MS 鉴定出 23 种与母羊卵巢内的 BMPR-1B 蛋白特异性相互作用的蛋白提取物。这些蛋白质主要与发育过程、多细胞有机体过程和生物调节有关。

 

构建了靶蛋白(BMP2、BMP4、GDF5、GDF9、RhoD、HSP 10)的信号通路,生物信息学预测表明 BMPR-1B 与蛋白相互作用,从而促进母羊卵巢排卵。

 

总之,所提出的结果为 BMPR-1B PPI 及其对绵羊产羔数的生物学功能提供了新的见解。此外,本研究为羊 BMPR-1B 的体外表达奠定了技术基础。为了进一步研究其生物学功能并提高诊断试剂的特异性,应开发 BMPR-1B 作为绵羊的主基因。

 

研究确定了探索 BMPR-1B 的 PPI 网络的新途径和见解。

 

1.Tian XE, Sun HX, Wang YJ. Genetic polymorphism of BMPR-IB gene and efect on litter size in three sheep breeds. J Northwest A F Univ. 2009;37(11):31–6. https://doi.org/10.13207/j.cnki.jnwafu.2009.11.031.

2.Yao YL, Reheman A, Xu YF. miR-125b contributes to ovarian granulosa cell apoptosis through targeting BMPR1B, a Major Gene for Sheep prolifcacy. Reprod Sci. 2018;11:1933719118770544. https://doi.org/10.1177/1933719118770544.

3.Ye L, Jiang WG. Bone morphogenetic proteins in tumour associated angiogenesis and implication in cancer therapies. Cancer Lett. 2016;380(2):586–97. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2015.10.036

 

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